Loạt truyện về các ninja rùa có tên gốc là Teenage Mutant Ninja Turtles, dịch sát nghĩa sẽ là “Ninja Rùa đột biến tuổi teen”. Bởi các chú rùa như xuất hiện trong phim, dù có hình dạng to lớn khổng lồ, nhưng thực chất đều chưa đến 18 tuổi.  

Từ nhỏ các chú lớn lên dưới các con đường của New York, quan sát và nhiễm các đặc trưng văn hóa của thiếu niên Mỹ, vì vậy trong phim dù là các bậc thầy võ thuật ninja nhưng các chú rùa có rất nhiều biểu hiện của tuổi thiếu niên. Ví dụ như lẻn ra ngoài hành hiệp về muộn và bị sư phụ phạt, thích ăn pizza và lậm nhạc hip-hop. 

Ví dụ dễ thấy nhất chính là đoạn phim dưới đây, khi đứng trong thang máy để đến chỗ kẻ thù nguy hiểm Shredder, chuẩn bị cho trận chiến một mất một còn, các chú rùa đã giải tỏa căng thẳng bằng cách dùng vũ khí như các nhạc cụ và thực hiện một màn beat-box điêu luyện, đem lại sự ngạc nhiên thích thú cho khán giả.

Ngoài các Ninja Rùa, vị sư phụ Splinter và cô nàng phóng viên April O’Neil (Megan Fox) thì phe thiện trong phim còn thêm một nhân vật đáng chú ý khác là anh chàng Vernon Fenwick (Will Arnett). Anh này vốn là phụ trách quay phim cùng làm việc với April tại đài truyền hình và có tình cảm với cô. Chính vì vậy mà khi April phát hiện ra các Ninja Rùa và bị cuốn vào cuộc chiến với Shredder, anh cũng bất đắc dĩ trở thành một người có liên quan. Dù vậy, sự giúp đỡ của Fenwick là hết sức quan trọng, cho thấy đây là một nhân vật có khả năng hành động và có thể sẽ đóng vai trò quan trọng hơn trong những phần phim tiếp theo. 

Clip phỏng vấn diễn viên và giới thiệu về nhân vật này cũng đồng thời cho khán giả thấy những cảnh quay hành động và kỹ xảo đẹp mắt đáng chú ý của phim: